EB替代染料              D1210

 

描述：EB替代染料是一种可代替溴化乙锭(EB)的核酸染液(20000倍浓缩液)，使用方法与EB完全相同。在紫外灯下双链DNA呈现绿色荧光，而单链RNA或DNA呈橙红色荧光，其灵敏度与EB相当。小鼠皮下注射试验尚未发现此EB替代染料有致癌作用；而溴化乙锭是一种疑似致癌剂。因此可用EB替代染料代替溴化乙锭进行核酸荧光染色。

 

储存：4℃避光保存  一年有效

 

使用方法:

1.         每100 ml融化的琼脂糖胶溶液中，加入2-5μl EB替代染料，轻轻摇匀。

2.         冷却至60℃左右(不烫手)时倒胶，待琼脂糖胶完全凝固后上样电泳。

3.         电泳完毕在紫外灯下观察。双链DNA呈绿色荧光，单链RNA或DNA呈橙红色荧光。按照与溴化乙锭相同的方法进行荧光照相。

4.         也可直接进行不含染料的琼脂糖胶电泳，电泳后将凝胶放入加有2-5μl EB替代染料/100ml电泳缓冲液或蒸馏水中染色10分钟。

 

注意事项:

1.       胶太厚会影响检测的灵敏度。

2.       EB替代染料可使核酸电泳迁移速率略有加快。

3.       照像记录时用红色滤光片效果会更好一些。

4.       虽然尚未发现EB替代染料有致癌作用，但作为有机化学试剂可能有其它未曾检测到的轻微毒性。操作时仍应戴手套进行防护。

5.       染色过度可用蒸馏水脱色，染色不足可以加入较多的染料。